細胞復蘇注意事項
?復蘇時動作要快,盡量減少胞內形成冰晶,影響復蘇后細胞活率。
? 融化時盡量不要碰到管口,以免容易造成污染。
?若一次性需要復蘇細胞很多,可以分批水浴解凍,防止傳熱不佳使得細胞融化時間延長。
?若需要同時復蘇好幾種細胞,提前在離心管和培養(yǎng)瓶上做好標記,或記住自己擺放的位置,不要弄混亂。
4、何判定細胞是否發(fā)生支原體污染:可以選用直接培養(yǎng)法、熒光染色或PCR方法檢測,比較常用的是PCR。當細胞發(fā)生支原體污染時,原則上是能夠去除支原體的,但是整個過程耗時耗力,還要考驗個人操作能力。所以如果不是處于細胞存量很少的情況下,建議發(fā)現污染時立刻棄掉,重新培養(yǎng)。
5、如果孵箱中只是某種細胞持續(xù)性大量死亡,而其他細胞狀態(tài)都沒問題的話,基本上可以確定就是孵箱存在特異性感染這類細胞的真菌或細菌,遇到這種情況,小六兒也不知道該怎么做,只能是先停一段時間看看。。。。。。
5、其他注意事項:每個星期都要更換孵箱底盤中的水(紫外照射后超純水);每兩周消毒一次孵箱:75%酒精擦拭一遍后,再用0.1%新潔爾滅擦拭一遍(都用超純水配制);可以在孵箱底部放一個燒杯,里面放入飽和硫酸銅,可以抑制霉菌生長。不過也有人說硫酸銅會改變孵箱的PH值,如果不是孵箱污染的情況很嚴重,建議不要使用。
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